cas:41994-02-9,生物素-酪氨,Biotinyl Tyramide的特點
2025-12-06
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生物素-酪氨(Biotinyl Tyramide)是一種結(jié)合了生物素(Biotin)與酪氨(Tyramide)的生物標(biāo)記試劑,在生物化學(xué)和生物醫(yī)學(xué)研究中具有廣泛應(yīng)用,尤其在信號放大技術(shù)中表現(xiàn)突出。
一、結(jié)構(gòu)特性
生物素-酪氨由生物素與酪氨通過共價鍵連接而成,分子式為C??H??N?O?S,分子量為363.48。其結(jié)構(gòu)包含兩部分:
生物素部分:具有特殊的五元環(huán)與六元環(huán)相連結(jié)構(gòu),賦予其與鏈霉親和素(Streptavidin)或親和素(Avidin)較高的親和力(結(jié)合常數(shù)Kd≈10?1? M),形成穩(wěn)定復(fù)合物。
酪氨部分:作為過氧化物酶(如辣根過氧化物酶,HRP)的底物,含有活性酚羥基,可在HRP催化下生成高活性自由基,與周圍生物分子共價結(jié)合。
結(jié)構(gòu)式:
二、作用機制
生物素-酪氨的核心功能是通過酪胺信號放大(Tyramide Signal Amplification, TSA)技術(shù)實現(xiàn)信號增強,其過程如下:
HRP催化反應(yīng):HRP標(biāo)記的抗體或探針識別靶點后,在過氧化氫(H?O?)存在下,催化生物素-酪氨的酪氨部分生成高活性自由基。
共價沉積:自由基與靶點附近的蛋白質(zhì)或核酸中的酪氨酸殘基共價結(jié)合,將生物素標(biāo)記固定于靶區(qū)域。
二級信號放大:通過鏈霉親和素偶聯(lián)物(如熒光染料、酶或金屬粒子)結(jié)合生物素,進一步放大信號,提高檢測靈敏度。
三、應(yīng)用領(lǐng)域
生物素-酪氨因其高靈敏度和特異性,廣泛應(yīng)用于以下領(lǐng)域:
免疫組織化學(xué)(IHC):
檢測低表達抗原,減少非特異性背景信號。
克服固定程序不理想或靶蛋白表達水平低導(dǎo)致的弱免疫標(biāo)記問題。
熒光原位雜交(FISH)與原位PCR:
增強核酸探針的信號,便于觀察核酸分布和表達情況。
蛋白質(zhì)組學(xué)研究:
標(biāo)記特定蛋白質(zhì)或肽段,研究蛋白質(zhì)相互作用、定位及翻譯后修飾。
細胞生物學(xué)研究:
標(biāo)記細胞表面分子,追蹤其動態(tài)變化及與其他分子的相互作用。
藥物研發(fā):
作為藥物載體,通過靶向識別腫瘤細胞表面受體,實現(xiàn)精準(zhǔn)藥物遞送。
多重染色與電鏡免疫標(biāo)記:
在多輪免疫染色中作為穩(wěn)定標(biāo)記形式,或配合金標(biāo)鏈霉親和素用于高分辨率定位。
四、儲存條件
為保持生物素-酪氨的穩(wěn)定性,需遵循以下儲存條件:
溫度:建議避光保存于-20℃以下,部分產(chǎn)品可短期儲存于-15℃。
避光防潮:防止光照和潮濕環(huán)境導(dǎo)致分解。
溶劑:通常以二甲基亞砜(DMSO)為溶劑,需密封保存以避免揮發(fā)。
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