FITC-L-Lysine，F(xiàn)ITC標(biāo)記L-賴氨酸是由熒光染料異硫氰酸熒光素（FITC）與天然氨基酸L-賴氨酸通過共價鍵偶聯(lián)形成的熒光探針，兼具L-賴氨酸的生物活性與FITC的熒光可視化能力，是生物化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)及醫(yī)學(xué)研究中的重要工具分子。

一、核心特性

1. FITC特性：

• 熒光特性：FITC是一種綠色熒光染料，其激發(fā)波長為490-495 nm，發(fā)射波長為515-520 nm，發(fā)出明亮的綠色熒光，熒光量子產(chǎn)率高（≈0.79）。

• 反應(yīng)活性：FITC分子中含有活性基團異硫氰酸基（-N=C=S），可與L-賴氨酸分子中的ε-氨基（側(cè)鏈氨基）或α-氨基發(fā)生特異性共價反應(yīng)，形成穩(wěn)定的酰胺鍵，實現(xiàn)對氨基酸的熒光標(biāo)記。

2. L-賴氨酸特性：

• 生物活性：L-賴氨酸是人體必需氨基酸，分子含兩個氨基（α-氨基和側(cè)鏈ε-氨基），是蛋白質(zhì)合成的關(guān)鍵原料。同時參與細(xì)胞信號傳導(dǎo)、核小體組裝、膠原蛋白合成等生理過程，也是神經(jīng)遞質(zhì)（如γ-氨基丁酸）合成的前體之一。

• 轉(zhuǎn)運機制：L-賴氨酸的跨膜轉(zhuǎn)運依賴特定轉(zhuǎn)運體，如中性氨基酸轉(zhuǎn)運體LAT1、陽離子氨基酸轉(zhuǎn)運體CAT1。利用FITC的熒光信號，可通過熒光強度定量分析細(xì)胞對L-賴氨酸的攝取效率，篩選轉(zhuǎn)運體抑制劑，或研究腫瘤細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞中轉(zhuǎn)運體的表達(dá)差異。

3. 結(jié)合特性：

• 構(gòu)型保留：標(biāo)記過程不破壞L-賴氨酸的天然構(gòu)型，可保留其與轉(zhuǎn)運體（如LAT1、CAT1）的結(jié)合能力及參與代謝的活性。

• 動態(tài)追蹤：通過FITC的熒光信號實現(xiàn)動態(tài)追蹤，觀察L-賴氨酸在細(xì)胞內(nèi)的代謝路徑和分布情況。

二、應(yīng)用領(lǐng)域

1. 細(xì)胞代謝與疾病機制研究：

• 腫瘤研究：追蹤L-賴氨酸在腫瘤細(xì)胞中的代謝路徑（如參與嘌呤、嘧啶合成），通過熒光成像區(qū)分腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞的代謝差異，輔助腫瘤診斷或評估抗代謝藥物療效。

• 神經(jīng)退行性疾病：研究L-賴氨酸在神經(jīng)元中的轉(zhuǎn)運與積累，探索其在阿爾茨海默?。ˋD）中對tau蛋白磷酸化的影響（賴氨酸殘基的乙酰化修飾可調(diào)控tau蛋白功能）。

• 肝臟代謝：觀察肝細(xì)胞對L-賴氨酸的攝取與代謝（如轉(zhuǎn)化為肉堿參與脂肪酸β-氧化），研究肝功能異常時的氨基酸代謝紊亂。

2. 藥物開發(fā)與靶向遞送驗證：

• 藥物偶聯(lián)物設(shè)計：用于設(shè)計“氨基酸-藥物"偶聯(lián)物，通過FITC標(biāo)記追蹤藥物（如化療藥）與L-賴氨酸偶聯(lián)后的體內(nèi)分布，驗證其是否通過氨基酸轉(zhuǎn)運體靶向進入腫瘤細(xì)胞，提高藥物靶向性并降低毒副作用。

3. 蛋白質(zhì)合成與轉(zhuǎn)運研究：

• 熒光示蹤：作為“熒光示蹤氨基酸"，可被細(xì)胞攝取后摻入新合成的蛋白質(zhì)中，通過熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡或流式細(xì)胞儀，實時觀察蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的合成速率、亞細(xì)胞定位（如細(xì)胞核、線粒體）及轉(zhuǎn)運過程，尤其適用于研究“蛋白質(zhì)周轉(zhuǎn)"（如應(yīng)激條件下的蛋白降解與合成平衡）。

三、合成與純化

1. 合成機制：FITC的異硫氰酸酯基團與L-賴氨酸的氨基（-NH?）在pH 8.0條件下反應(yīng)，形成穩(wěn)定的硫脲鍵。

2. 純化方法：反應(yīng)后需通過透析或離心純化，去除未反應(yīng)的FITC，以確保產(chǎn)物純度。標(biāo)記效率可通過熒光光譜儀定量檢測，優(yōu)化反應(yīng)條件（如溫度、時間、pH值）可提升標(biāo)記效率至90%以上。

四、存儲條件

1. 避光干燥：需避光、干燥儲存，以防止FITC因光照或潮濕而降解。

2. 低溫保存：建議-20℃密封儲存，避免反復(fù)凍融（可分裝為小劑量，單次使用），有效期通常為12個月。

3. 化學(xué)穩(wěn)定性：在中性條件下穩(wěn)定，強酸/強堿環(huán)境可能導(dǎo)致FITC與賴氨酸的偶聯(lián)鍵斷裂，或FITC自身降解。

FITC-L-Lysine，F(xiàn)ITC標(biāo)記L-賴氨酸

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